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Come scegliere la soluzione di conservazione del campione?

numero Sfoglia:0     Autore:Editor del sito     Pubblica Time: 2021-02-18      Origine:motorizzato

Come scegliere la soluzione di conservazione del campione?

1, Come scegliere il tipo di soluzione di conservazione?

Secondo la composizione del liquido, può essere approssimativamente diviso in due tipi, inattivato e non inattivato. Tra questi, la soluzione di conservazione del virus inattivata contiene tris, sale di guanidina, EDTA, ecc., Il cui scopo principale è distruggere le mani proteiche di celle e virus e rilasciare acidi nucleici, in modo che il rilevamento di acido nucleico possa essere eseguito da successivi Tempo fluorescente RT-PCR per determinare se il campione contiene la sequenza dei virus. La soluzione di conservazione inattivata può infelicamente lasso della struttura del virus e far perdere la capacità di infettare. È più sicuro per gli ispettori e può inibire efficacemente la riproduzione di funghi e batteri. Tuttavia, a causa dell'aggiunta del sale di Guanidina, può lasciare gli ioni salini nella soluzione di acido nucleico. Se la concentrazione è troppo alta, e se l'attività della polimerasi nel kit di test a valle è altamente sensibile alla concentrazione di ioni saltose, causerà il ritardo del valore CT del test o persino falso negativo.

La soluzione di conservazione non inattivata generalmente include i tipi UTM e VTM. I componenti della soluzione di conservazione dei virus non inattivati ​​si basano principalmente sulla soluzione di Hank. Sulla base della soluzione di Hank, aggiunge anche vari buffer come Genanticin, antibiotici fungonali, BSA (Bovine la quinta componente dell'albumina sierica), il tampone biologico HePes, gli amminoacidi, i criocatoterati, la glicerina e altri componenti sono utilizzati per


mantenere l'integrità e l'attività biologica del virus. La soluzione di conservazione non inattivata conserva meglio l'integrità del virus, quindi il tasso di rilevamento è più alto, ma ha bisogno di trattamento di inattivazione del bagno d'acqua prima del rilevamento.

Gli utenti possono scegliere il tipo di soluzione di conservazione ragionevolmente in base ai propri scenari di utilizzo.


2, Dopo l'archiviazione del campione, qual è la sensibilità di rilevamento?

Per facilitare la selezione di diversi tipi di tubi di stoccaggio, abbiamo testato marchi diversi, sotto le condizioni di stoccaggio di 4 ℃ e diversi giorni di archiviazione (il primo giorno, il terzo giorno, il settimo giorno, il quattordicesimo giorno e il

trentesimo giorno). La sensibilità del rilevamento di acido nucleico del nuovo Coronavirus

è come segue.

1

2

Dopo 14 giorni di deposito a 4 ° C, il confronto della conservazione effec t di diverse marche di UTM

1


Al fine di facilitare la selezione di diversi tipi di tubi di conservazione, abbiamo testato la sensibilità del rilevamento di acido nucleico del nuovo Coronavirus in diverse marche, condizioni di conservazione della temperatura ambiente e diversi giorni di archiviazione (il primo giorno, il terzo giorno e il settimo giorno). I risultati sono i seguenti.


Dopo 7 giorni di stoccaggio a temperatura ambiente, confronto da effetti di archiviazione di diversi marchi di ITM

1

Dopo 7 giorni di stoccaggio a temperatura ambiente, confronto da effetti di stoccaggio di diverse marche di VTM


1



Dopo 7 giorni di stoccaggio a temperatura ambiente, confronto da effetti di archiviazione di diversi marchi di UTM

2

In generale, il valore CT del Bioteke è inferiore a quello di alcuni marchi comuni sul mercato, indipendentemente dalla temperatura ambiente o dalle condizioni di conservazione della 4 ℃. La sensibilità di rilevamento è più alta e i risultati del test sono più stabili.


3, qual è l'effetto della soluzione di conservazione inattivazione (ITM)?

Tavolo. Numero di placche in diversi momenti di inattivazione (0, 1, 2, 5, 10, 20, 40min)

Virus

Titer virus

Tempo di inattivazione

Numero di placche

Accettabilit.

y

HSV-1.







1 × 10 ^ 5

PFU / ML.







0

48

55

51

/

1 minuto

0

0

0

Accettato

2 minuti

0

0

0

Accettato

5 minuti

0

0

0

Accettato

10 minuti

0

0

0

Accettato

20 min

0

0

0

Accettato

40 min.

0

0

0

Accettato

1



Figure della placca in diversi momenti di inattivazione (0, 1 5, 40 min) (placca è mostrata nella scatola rossa)


Conclusioni:

Prodotto di bioteke, i media di trasporto inattivanti (ITM), possono effettivamente inattivare il virus HSV 1.


4, Caratteristiche della soluzione di conservazione del virus Bioteke


a) Fornire più tipi di soluzioni di conservazione come UTM, VTM e ITM;

b) Può essere utilizzato con il tampone di bioteke per soddisfare più esigenze;

c) Materie prime selezionate, abbinate al kit di estrazione di acido nucleico Bioteke per garantire la quantità iniziale della copia del campione.


5.% 2 L'ispezione riporta che Bioteke ha ottenuto la soluzione di conservazione dei virus


Standard

Unità di prova

ISO EN11137-1: 2015 EN11137-2: 2013

ISO EN11137-3: 2017

Wujiang Dasheng Testing Technology Co., Ltd.

ISO11737-1: 2018.

SGS.

RAGGIUNGERE

SGS.

ISO 10993.

SGS.

Allegato: ambiente di produzione


Riferimenti

【1】 \"Nuova Guida alla tecnologia di test di laboratorio di Pneumonia Coronary (terza edizione)\", Centro cinese per il controllo e la prevenzione delle malattie.


【2】 \"Linee guida intermedie per la raccolta, la manipolazione e il test dei campioni clinici da pazienti sotto inchiesta (PUIS) per il 2019 Novel Coronavirus (2019-NCOV)\".

【3】 A Stephen K Hashmi, Miriam Bührle, Michael Wöl Flea, et al.

Qualifica di

I tamponi ad alto recupero e affollati rispetto ai tamponi tradizionali Rayon per il monitoraggio ambientale microbiologico delle superfici [J]. PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology, 2008, 62 (3): 191.

【4】 Daley P, Castriciano S, Chernesky M, Smieja M. Confronto dei tamponi floccati e Rayon per la raccolta di cellule epiteliali respiratorie da volontari non infetti e pazienti sintomatici. J clin microbiol.

2006; 44 (6): 2265-2267. DOI: 10.1128 / JCM.02055-05.

【5】 BA Huajie, Jin Ming, Wang Linsheng, et al. Confronto degli effetti di battitura del DNA tra tamponi in nylon floccaggio e tamponi di cotone [J]. Journal cinese della medicina forense, 2015 (03): 53-56.

【6】 Liu Yanbin, Liu Tao, Cui Yue, Wang Bo, Luo Fengming. Confronto di due metodi di campionamento del tampone nasale e del tampone della gola in screening acido nucleico per la nuova polmonite di Coronavirus [J]. Journal cinese di assistenza respiratoria e critica, 2020, 02: 141-143.


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