Kit di rilevamento della genotipizzazione del papillomavirus umano (HPV) (metodo PCR di fluorescenza)

A. Uso previsto

• Questo kit viene utilizzato per il rilevamento qualitativo in vitro di papillomavirus umano ad alto e basso rischio (HPV).

• L'HPV ad alto rischio comprende il tipo 16,18,26,31,33,35,39,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82;  

• L'HPV a basso rischio include il tipo 6,11,40,42,43,44/55,54,57/71,61,70,72,81,84.

B. Principio

• Questo reagente è un sistema di dosaggio TAQMAN® QPCR basato su sonda fluorescente multiplex.

• Primer e sonde specifici sono progettati per il rilevamento di diversi tipi di papillomavirus umano (HPV).

• Il controllo interno (IC) viene utilizzato come metodo di monitoraggio per evitare i risultati dei test falsi negativi.

• Viene aggiunto un sistema enzimatico UDG/DUTP per degradare il prodotto di amplificazione per evitare risultati falsi positivi.

• Questo kit è un sistema liofilizzato completamente premiscelato. L'enzima TAQ, l'enzima UDG, il tampone di reazione, i primer e le sonde specifici sono stati pre-posizionati nei reagenti.

C. Componenti

Conponenti	8 campioni/kit	24 campioni/kit	Ingrediente
Reagente liofilizzato HP04	Tubi a strisce 8 × 8	Tubi a strisce 24 × 8	Primer e sonde specifiche per il rilevamento di patogeni target, mix DNTP/DUTP, MG2+, TAC polimerasi e enzima UDG
Tampone di lisi HPV	1 ml × 1 tubo	2,5 ml × 1 tubo	Agente attivo di superficie, soluzione salina bilanciata
Controllo positivo dell'HPV	400 ml × 1 tubo	400 ml × 1 tubo	Plasmide contenente ogni sequenza genica target
Controllo negativo HPV	400 ml × 1 tubo	400 ml × 1 tubo	Plasmide contenente sequenza di controllo interno
Soluzione di dissoluzione	1 ml × 1 tubo	Tubi da 1 ml × 3	Stabilizzatore

D. deposito e shelf life

Trasporto a temperatura ambiente inferiore a 37 ℃ (＜ 1 mese).

Conservato a -20 ℃ ± 5 ℃ per 1 anno.

Il congelamento e lo scongelamento ripetuti non devono superare 7 volte.

E.  Panoramica del processo di test

Amplificazione F. PCR

1. Metti i tubi di reazione nello strumento PCR e imposta bene i nomi di ciascuna reazione nell'ordine corrispondente.

2. Selezionare FAM, VIC/HEX, ROX e CY5 Quattro canali di fluorescenza per il rilevamento. Gli obiettivi corrispondenti di ciascun canale di fluorescenza sono mostrati nella tabella seguente:

Posizione	Fam	Vic/Hex	Rox	Cy5
Bene 1	HPV Tipo 16	HPV Tipo 18	Tipo HPV 26	Controllo interno (IC)
Bene 2	Tipo HPV 31	HPV Tipo 33	HPV Tipo 35	HPV Tipo 39
Bene 3	Tipo HPV 45	HPV Tipo 51	HPV Tipo 52	HPV Tipo 53
Bene 4	HPV Tipo 56	Tipo HPV 58	HPV Tipo 59	Tipo HPV 68
Bene 5	Tipo HPV 66	Tipo HPV 73	HPV Tipo 82	Tipo HPV 81
Bene 6	HPV Tipo 6	HPV Tipo 11	Tipo 40 HPV	Tipo HPV 42
Bene 7	HPV Tipo 43	Tipo HPV 44/55	Tipo HPV 54	HPV Tipo 61
Bene 8	Tipo HPV 57/71	Tipo HPV 70	Tipo HPV 72	Tipo HPV 84

G.  Analisi e interpretazione dei risultati

Fare riferimento al manuale dell'utente.

Specifica delle prestazioni di H.

1. Limitazione di detection: 1000 copie/ml

2. Precisione: il coefficiente di variazione (CV,%) del valore CT della precisione all'interno di batch/tra i batch è≤5%.

3. Accuratezza: il tasso di conformità del riferimento negativo/positivo: 100%.

4.Specificità: gli organismi Farget erano stati analizzati in silico per la potenziale reattività crociata con i primer o le sequenze di sonda.

L'omologia con altre specie è inferiore all'80%.

L'analisi della specificità ha mostrato che non vi è alcuna reazione trasversale con Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Gardnella vaginalis, Haemophilus ducreyi, Candida albicans, Streptococcus Agalactiae, ureaplasma TreeAlyticum Onema pallidum, tipo di virus dell'herpes simplex 1 e 2.