Infezione del tratto urinario e strumento di rilevamento della resistenza ai farmaci: soluzione rapida e accurata di Bioteke

Infezione del tratto urinario (UTI) e kit di rilevamento del gene della resistenza ai farmaci

- Soluzione diagnostica rapida e accurata

Sfondo

• L'infezione del tratto urinario (UTI) è una malattia comune e altamente diffusa in tutto il mondo e il suo tasso di incidenza è secondo solo per le malattie del tratto respiratorio tra le malattie infettive.

• Secondo le statistiche straniere, il tasso di incidenza di UTI è del 2-5%, che è una malattia infettiva con alta incidenza e mortalità e minaccia seriamente la salute e la sicurezza della vita.

• Secondo le statistiche pertinenti dell'Organizzazione mondiale della sanità (OMS), da 130 milioni a 175 milioni di persone soffrono di UTI ogni anno in tutto il mondo e l'UTI è diventata la seconda più grande malattia infettiva dopo l'infezione del tratto respiratorio. Si stima che negli Stati Uniti il ​​13,3% (12,8 milioni) di donne e il 2,3% (2 milioni) di uomini siano infettati con UTI ogni anno, con conseguente spesa del sistema medico degli Stati Uniti circa 3,5 miliardi di dollari ogni anno.

• Tuttavia, negli ultimi 10 anni, con l'ampia applicazione di farmaci antimicrobici ad ampio spettro nei campi clinici e di allevamento di animali, lo spettro di resistenza degli agenti patogeni si è spostato e il problema della resistenza ai farmaci è diventato sempre più grave. L'uso empirico di antibiotici nel trattamento clinico può ritardare il miglior tempo di trattamento e portare all'abuso di antibiotici. Pertanto, la diagnosi di agenti patogeni e la previsione della resistenza ai farmaci sono molto importanti nel guidare il trattamento farmacologico dei pazienti con infezioni del tratto urinario.

• L'urina è sterile in circostanze normali, ma non significa che tutti i batteri nelle urine siano batteri patogeni. Solo quando i batteri rilevati nelle urine possono crescere e moltiplicare nel tratto urinario e causare infezione, possono essere diagnosticati come batteri patogeni dell'infezione del tratto urinario. I patogeni del tratto urinario sono invasivi e possono invadere e colonizzare l'urotelio e moltiplicare nelle urine. Più del 95% dei patogeni di infezione del tratto urinario sono singole specie di batteri. Esistono anche un numero limitato di complicate infezioni del tratto urinario causate da più agenti patogeni.

• Al momento, il gold standard per la diagnosi di agenti patogeni di infezione del tratto urinario è l'isolamento batterico delle urine, la coltura, l'identificazione e l'analisi della sensibilità ai farmaci. Tuttavia, il metodo di coltura ha un lungo ciclo, di solito 5-7 giorni, e ha un tasso positivo basso e un intervallo di applicazioni limitato (alcuni agenti patogeni sono difficili da coltivare in vitro). A causa del lungo periodo dall'inizio alla segnalazione, è facile perdere il miglior periodo di trattamento nella fase acuta. Negli ultimi anni, i test di acido nucleico sono stati sempre più utilizzati nella diagnosi di patogeni di infezione del tratto urinario in tutto il mondo. Il bersaglio dei test di acido nucleico è il materiale genetico del patogeno. Amplificando selettivamente la sequenza target, è possibile ottenere una sensibilità e specificità di rilevamento molto elevata. Poiché i test di acido nucleico non richiedono l'isolamento batterico e la coltura, può rilevare rapidamente e sensibilmente i patogeni nelle prime fasi della malattia.

  
  

Progetto di rilevamento Bioteke UTI e DR

• Questo progetto intende sviluppare un kit di rilevamento dell'acido nucleico per i patogeni di infezione del tratto urinario e i geni resistenti ai farmaci basati su una piattaforma innovativa di rilevamento rapido dell'acido nucleico e la tecnologia brevettata di liofilizzazione della PCR fluorescente per guidare il trattamento clinico nelle prime fasi della malattia.

• Infezione del tratto urinario Bioteke (UTI) e pannello DR (metodo PCR di fluorescenza) viene utilizzato per la rilevazione qualitativa in vitro di 19 acidi nucleici patogeni comuni e 12 geni comuni resistenti ai farmaci nei campioni di urina.

• Infezione del tratto urinario Bioteke (UTI) e pannello DR (metodo PCR di fluorescenza) Progetta primer e sonde specifiche per diversi agenti patogeni e geni resistenti ai farmaci e utilizza la reazione a catena della polimerasi (QPCR) e la tecnologia a sonda fluorescenti multiple per amplificare e rilevare sequenze di acido nucleico specifiche di agenti patogeni e geni resistenti ai farmaci. Aggiungendo il lievito commestibile come standard interno (IC), il processo di estrazione e rilevazione dell'acido nucleico dei patogeni nelle urine viene monitorato per evitare efficacemente risultati falsi negativi. Al fine di evitare la contaminazione dell'aerosol del prodotto di amplificazione, il sistema enzimatico UDG/DUTP viene aggiunto al sistema di amplificazione per decomporre efficacemente il prodotto di amplificazione ed evitare risultati falsi positivi.

• Questo kit è un sistema liofilizzato completamente premiscelato. L'enzima TAQ, l'enzima UDG, il tampone di reazione, i primer e le sonde specifici necessari per l'amplificazione sono tutti essiccati al congelamento nei tubi PCR. I pozzi 1-8 contengono polveri liofilizzate per diversi geni target. Ogni pozzetto utilizza canali di fluorescenza a 4 colori per il rilevamento e vengono rilevati un totale di 31 acidi nucleici dell'analita target. Il metodo d'uso è semplice e può essere testato direttamente dopo aver aggiunto la soluzione di ricostituzione e l'acido nucleico del campione estratto.

Significato del progetto

• Le malattie infettive sono sempre state un importante problema di salute pubblica in tutto il mondo. Nella sua diagnosi e trattamento, è cruciale un'identificazione rapida e accurata dei patogeni. I metodi di rilevamento tradizionali includono principalmente il rilevamento morfologico, la separazione della coltura, il rilevamento biochimico, l'immunologia e il rilevamento dell'acido nucleico, che sono semplici da operare, relativamente bassi nei costi di rilevamento e hanno una buona sensibilità e specificità. Sono ancora ampiamente utilizzati nella pratica clinica. Sebbene la tecnologia di rilevamento dell'acido nucleico MNGS metagenomico possa superare il problema del rilevamento di un singolo patogeno, ha requisiti elevati per attrezzature, personale e costi.

• L'uso della tecnologia PCR quantitativa a fluorescenza multiplex multiplex in questo campo supera sostanzialmente le carenze di altri metodi di rilevamento, come lunghi tempi, funzionamento complesso e requisiti elevati del personale.

1. Guida ai farmaci: clinicamente, i farmaci si basano principalmente sull'esperienza nel trattamento delle infezioni del tratto urinario, specialmente nell'uso cieco di antibiotici. I farmaci basati sull'identificazione dei patogeni sono la chiave per migliorare la prognosi del paziente.

2. Trova la causa della malattia in modo tempestivo: sebbene il tradizionale metodo di coltura batterica abbia un'elevata precisione, richiede tempo, abbia una percentuale considerevole di falsi negativi ed è soggetto a ritardare il trattamento. La rilevazione quantitativa della PCR quantitativa di fluorescenza multiplex di acido nucleico può identificare i patogeni in una fase iniziale e utilizzare farmaci sintomatici nel tempo, in modo da migliorare meglio la prognosi dei pazienti con infezione del tratto urinario.

3. Migliorare le capacità di rilevamento dell'ospedale: dopo che questo metodo è stato stabilito in ospedale, non può solo fornire metodi di rilevamento migliori per i pazienti che vengono in ospedale, ma anche fornire un nuovo metodo di rilevamento per l'ospedale. Allo stesso tempo, fornisce anche dati di base medica più completi per la clinica.