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Introduzione alle macchine PCR

numero Sfoglia:0     Autore:Editor del sito     Pubblica Time: 2021-11-08      Origine:motorizzato

Introduzione alle macchine PCR

Macchina PCR., anche conosciuto come strumento di amplificazione del gene PCR, strumento di amplificazione PCR, strumento di amplificazione del nucleico di reazione a catena della polimerasi, è uno strumento che amplifica il DNA specifico utilizzando la tecnologia PCR (Polymerase Chain Reaction). La macchina PCR è ampiamente utilizzata nei laboratori medici e biologici, come per determinare se un corpo di prova esibirà le macchine PCR sono ampiamente utilizzate nei laboratori medici e biologici, ad esempio, per determinare se un organismo di prova esibisce un profilo di malattia genetica, per diagnosticare infettivi Malattie, per replicare i geni e per identificare la parentela. Cos'è una macchina PCR?

Ecco l'elenco dei contenuti:

l la struttura di base di una macchina PCR

l Principio di funzionamento della macchina PCR

l Cinetica di reazione delle macchine PCR


La struttura base di una macchina PCR

Una macchina PCR di solito è costituita da una parte di copertura calda, una parte del ciclo termico, una parte di trasmissione, una parte di controllo e una parte di alimentazione, ecc.

Principio di funzionamento della macchina PCR

Il principio di lavoro delMacchina PCR.è simile al naturale processo di replica del DNA, la cui specificità dipende da primer oligonucleotide complementari alle estremità della sequenza di destinazione, ed è composto da tre passaggi di reazione di base: estensione della denaturazione-ricottura.

1. Denaturazione del DNA del modello

Il DNA del modello viene riscaldato a circa 93 ° C per un certo periodo di dissociazione del DNA del modello a doppio filamento o del DNA a doppio filamento formato da una macchina PCR per renderlo single-strofinato in modo tale da poter collegare i primer in preparazione per il prossimo round di reazione.

2. ricottura (denaturazione) del DNA del modello e dei primer

Dopo che il DNA del modello viene denaturato in monofilo dal riscaldamento, la temperatura viene abbassata a circa 55 ° C e i primer sono abbinati e legati alla sequenza complementare a strofinacci del DNA del modello.

3. Estensione dei primer

Il coniugato del modello del DNA-Primer è sintetizzato sotto l'azione della polimerasi TAQDNA, utilizzando DNTP come materiale di reazione e la sequenza di destinazione come modello, per sintetizzare un nuovo filo replicato semi-conservato complementare al principio della base del DNA secondo il principio della base -paire e replica semi-conservata.

Ripetendo il processo di estensione della denaturazione, è possibile ottenere più \"catene replicate semi-conservate \" e queste nuove catene possono essere utilizzate come modelli per il ciclo successivo.

La macchina PCR richiede 2 ~ 4 minuti per completare ciascun ciclo, e quindi su ripetutamente, il DNA prodotto in ciascun ciclo può diventare il modello per il ciclo successivo e ogni ciclo amplifica il numero di copia della regione specifica del DNA tra due primer sintetici di 1 -fold, e il prodotto della macchina PCR amplifica rapidamente nella forma esponenziale di 2. Dopo 25 ~ 30 cicli (2 ~ 3 ore), la macchina PCR può teoricamente amplificare il gene più di 109 volte dopo 25 ~ 30 round (2 ~ 3 ore), e in pratica, può generalmente raggiungere 106 ~ 107-Piega.

Cinetica di reazione della macchina PCR

I tre passaggi di reazione delMacchina PCR.sono ripetuti, con conseguente aumento esponenziale della quantità di amplificazione del DNA. L'amplificazione del DNA finale della reazione può essere calcolata usando y = (1 + x) n. Y rappresenta il numero di copie del frammento del DNA amplificato, X rappresenta l'efficienza media dell'amplificazione per amplificazione e N rappresenta il numero di cicli. Il valore teorico dell'efficienza di amplificazione media è al 100%, ma nella fase iniziale della reazione effettiva, l'aumento del frammento del DNA della sequenza di destinazione è esponenziale e con l'accumulo graduale dei prodotti della macchina PCR, il frammento del DNA amplificato non aumenta più Esponenziale, ma entra nel periodo di crescita lineare o del periodo fisso, cioè, l'effetto \"stagnazione \", in modo che l'efficienza media della macchina PCR raggiunga l'efficienza media della macchina PCR non raggiunge il valore teorico.

Bioteke Corporation, che si concentra sulla diagnostica molecolare e sulla rilevazione rapida, in particolare, sull'estrazione di acido nucleica, è un produttore di alta tecnologia professionale e macchine PCR. Si trova nella città di Wuxi, nella provincia di Jiangsu, in Cina. Quindi, non vediamo l'ora di collaborare con te.

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