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Informazioni sulla preparazione di soluzioni d'oro colloidali per il test antigene

numero Sfoglia:0     Autore:Editor del sito     Pubblica Time: 2022-05-25      Origine:motorizzato

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Informazioni sulla preparazione di soluzioni d'oro colloidali per il test antigene

La preparazione di una soluzione d'oro colloidale per il Test dell'antigene Adotta il metodo di riduzione del citrato di Trisodium per preparare una soluzione di oro colloidale. Prendi 1000 ml di acqua ultrapura e riscaldarla fino a bollire su un agitatore magnetico, aggiungere 40 ml di soluzione di acido cloroaurico all'1%, quando la soluzione bolle di nuovo, aggiungi rapidamente 36 ml di soluzione di citrato di trisodio all'1%, continua a bollire quando il colore del colore La soluzione trasforma 5 minuti viola, spegnere il riscaldatore e ripristinare il volume originale con acqua ultrapura dopo il raffreddamento. Il diametro medio e il potenziale zeta delle particelle d'oro colloidali sono stati misurati con un analizzatore di dimensioni di nanoparticelle e conservati a temperatura ambiente al buio. Allora, qual è le informazioni sulla preparazione di soluzioni d'oro colloidali per il test antigene? Diamo un'occhiata.

Ecco l'elenco dei contenuti:

L Preparazione di coniugati con oro colloidale

L Preparazione di strisce di test antigene rapide

l limite di rilevamento minimo

l test di stabilità

Preparazione di coniugati con oro colloidale

Prendi 100 ml di oro colloidale del test dell'antigene in due becher puliti, rispettivamente, secondo le condizioni di pH marcate ottimizzate, aggiungere 3,3 ml e 2,1 ml di carbonato di potassio 0,1 mol/L per regolare il pH, mescolare con un agitatore magnetico a 300 r/ min per 10 minuti e aggiungere anticorpo monoclonale di proteina anti-N di topo e proteina DNP-BSA sono state ciascuna 1 mg e agitate per 15 minuti; Sono stati aggiunti 2 ml di soluzione BSA al 10% e sono stati aggiunti 2 ml di soluzione BSA al 10% e la agitazione è stata continuata per 20 minuti; Dopo l'agitazione, la soluzione oro colloidale del test dell'antigene è stata trasferita a due tubi da centrifuga da 50 ml, impostato i parametri di centrifuga erano 9000 r/min, 20 minuti e 4 ° C e la centrifugazione è stata eseguita. Dopo la centrifugazione, eliminare attentamente la tuba di centrifuga, non agitare, rimuovere il surnatante con una pipetta, raccogliere il precipitato, ricostituirlo con diluente coniugato a 10 ml e conservare a 4 ° C al buio. Il diametro medio e il potenziale zeta delle particelle coniugato dell'oro colloidale del test dell'antigene sono stati misurati mediante un analizzatore di dimensioni delle nanoparticelle.

Preparazione di strisce di test antigene rapide

Il cuscinetto campione è stato rivestito uniformemente con la soluzione di trattamento della cuscinetto del campione e la quantità di rivestimento di ciascuna fibra di vetro era di 30 ml ed essiccata a 50 ° C per 24 ore. Diluire il Test rapido dell'antigene Anticorpo monoclonale di proteina monoclonale di topo-N-N e coniugato con coniugato con coniugato con coniugato coniugati coniugati di diluiti con il coniugato con coniugato con coniugatore colloidale del coniugale, il Volume è stato uniforme rivestito con liquido, la quantità di rivestimento di ciascuna fibra di vetro era di 30 ml ed era essiccata a 45 ° C per 24 ore. L'anticorpo monoclonale di proteina anti-N di topo e l'anticorpo policlonale anti-DNP di coniglio sono stati diluiti con PBS contenente 0,01 mol/L pH7,4 e trealosio al 5% alla concentrazione di 2,0 mg/ml e 1,0 mg/ml, rispettivamente. Come linea di rilevamento (linea T) e linea di controllo di qualità (cline), l'anticorpo di cattura è stato rivestito su una membrana di nitrocellulosa (membrana NC) ed essiccato a 45 ° C per 48 ore. Il film NC preparato, il cuscinetto coniugato, il cuscinetto campione e il cuscinetto che assorbono l'acqua sono stati incollati sulla piastra inferiore in PVC a turno, tagliati in 3 mm/stripe con un scivoloso, messo in una custodia per carte e confezionati in una borsa in alluminio. Durante il test, inserire il tampone rinofaringeo nel tubo di sollevamento pre-riempito con la soluzione di estrazione (10mol/LPBS, ph7,4, 1%di NP-40) e aggiungere 3 gocce (100μL) al foro del campione del test del test carta dopo estrazione per 15s. Time di reazione di 15 minuti per l'interpretazione visiva. La linea T di prova dell'antigene e il clinico sono entrambi positivi, la linea T non è colorata, il clinico è negativo, il clino non è colorato, indicando che la striscia di prova è efficace e deve essere nuovamente testata.

Limite di rilevamento minimo

Sono stati condotti studi di limite di rilevamento minimo con colture di virus uccisa di calore. L'eluato da tamponi rinofaringei di persone sane è stato usato come matrice negativa per il test dell'antigene. Innanzitutto, è stata eseguita una diluizione a gradiente di 10 volte. Dopo il risultato negativo del test rapido dell'antigene, la concentrazione precedente era quindi diluizione del gradiente di 2 volte e non meno di 19 volte su 20 test erano positivi. Il livello di concentrazione (≥95%) è stato utilizzato come limite di rilevamento minimo del reagente.

Test di stabilità

Posizionare il test dell'antigene preparato finito con una scheda di reagente in un forno da 50 ° C e test con sostanze di controllo della qualità ad alta e bassa concentrazione ogni due settimane. Ripeti il ​​test 3 volte per ciascun campione. La differenza nella profondità della banda tra il reagente di distruzione accelerato ad alta temperatura e il reagente di controllo per 1 settimana e 8 settimane.

Quanto sopra sono le informazioni rilevanti sulla preparazione della soluzione dell'oro colloidale per il test antigene. Se sei interessato al file Test antigene rapido covid-19, SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test, puoi contattarci. Il nostro sito Web è www.bioteke.cn.


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