numero Sfoglia:0 Autore:Editor del sito Pubblica Time: 2021-11-20 Origine:motorizzato
Quando Macchine PCR Rilevare fattori di microinfezione, sono soggetti a vari problemi dovuti alla contaminazione. Pertanto, quando operano le macchine PCR, gli operatori dovrebbero seguire rigorosamente alcune procedure operative per ridurre al minimo la possibile contaminazione da PCR o eliminare il verificarsi di contaminazione e altri problemi. Di seguito descriverà l'uso di macchine PCR e precauzioni.
Ecco l'elenco dei contenuti:
l Istruzioni per il funzionamento della macchina PCR.
L Note sull'uso delle macchine PCR.
Metodi di cura e manutenzione dello strumento PCR.
1. Primer: determinare la specificità di Macchina PCR amplificazione. Primer diversi vengono utilizzati a seconda del test del DNA e ogni microrganismo patogeno ha i suoi primer specifici.
2. DNA polimerasi resistente al calore: questo enzima è isolato da batteri resistenti al calore e può resistere a temperature elevate di 90 ° C-100 ° C.
3. 10 × PCR Buffer macchina: 500mol/L KCl; 100 mmol/L Tris-HCl (PH8,4,20 ℃) 150MOL/L MGCL2,1MG/mL di gelatina. Il tampone 10 × PCR è stato acquistato insieme all'enzima.
4,5 mmol/l DNTP PCR Macchina Soluzione stomata: combinare 100 mg ciascuno di sali di sodio DATP, DCTP, DGTP e DTTP, aggiungere acqua deionizzata sterilizzata per dissolvere, regolare il pH in neutro con NaOH, dispensare 300 μL ciascuno e memorizzare a -20 ℃ . La concentrazione di DNTP è determinata dal metodo di assorbimento UV. Le soluzioni DNTP disponibili ora sono prodotti commercializzati.
5. Modello di DNA: il campione da testare viene trattato con una soluzione di trattamento. Diversi trattamenti e operazioni variano, ma lo scopo è quello di esporre il DNA testato nel campione della macchina PCR.
1. La macchina PCR deve essere posizionata su una piattaforma orizzontale e robusta con una tensione di corrispondenza del sistema di alimentazione esterno ed è necessario un buon filo di messa a terra.
2. La temperatura ambiente è mantenuta a circa 23 ℃ e l'umidità è mantenuta a circa il 60%.
3. La macchina PCR deve essere dotata di un regolatore di tensione di potenza ≥ 3000W.
4. Dovrebbe essere pulito e mantenuto regolarmente.
5. Quando si utilizza la macchina PCR, le fasi di utilizzo sopra devono essere osservate rigorosamente.
1. Pulizia della cuvetta prima aprire il coperchio di la macchina PCR, quindi immergere la cuvetta con etanolo al 95% o una soluzione di pulizia del 10% per 5 minuti, quindi pulire i pozzi contaminati; aspirare il liquido con una micropipetta e utilizzare un tampone di cotone per assorbire il liquido rimanente; Accendere la macchina PCR, impostare il programma PCR per mantenere la temperatura a 50 ° C e farlo funzionare e lasciare che il liquido residuo evapora e rimuova. Di solito, 5-10 minuti sono sufficienti.
2. Pulizia di copertura calda per la macchina PCR quantitativa fluorescente, quando c'è contaminazione fluorescente, e questa contaminazione non proviene dalla cuvetta o quando c'è contaminazione o residuo influisce sul coperchio a caldo della macchina PCR, è necessario utilizzare l'aria compressa o Acqua pura per pulire il fondo del coperchio del cuscinetto, per garantire che il foro della cuvetta sia pulito, nessun sporco bloccando il percorso ottico.
3. Pulire la superficie esterna dello strumento PCR che pulizia la superficie esterna dello strumento può rimuovere polvere e grasso, ma non all'altezza dell'effetto della disinfezione. Scegli un agente di pulizia non corrosivo per pulire la superficie esterna della macchina PCR.
4. Sostituire il fusibile prima spegnere la macchina PCR, scollegarlo, aprire la scatola dei fusibili accanto al martinetto di alimentazione, sostituirlo con un fusibile di riserva e osservare se ritorna alla normalità.
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