numero Sfoglia:31 Autore:Editor del sito Pubblica Time: 2022-12-05 Origine:motorizzato
Estrazione di DNA, RNAe le proteine sono un metodo fondamentale utilizzato nella biologia molecolare. Queste biomolecole possono essere isolate da qualsiasi materiale biologico per i successivi scopi di elaborazione a valle, analitici o preparativi. In passato, il processo di estrazione e purificazione dell'acido nucleico era complicato, che richiedeva tempo, laborioso e la produttività complessiva era limitata. Attualmente, ci sono molti metodi specializzati disponibili per l'estrazione di biomolecole pure, come protocolli basati su soluzioni e basate su colonne. I metodi manuali hanno fatto molta strada nel tempo e vari prodotti commerciali includono kit completi contenenti la maggior parte dei componenti necessari per isolare gli acidi nucleici, ma la maggior parte di questi richiede fasi di centrifugazione ripetute seguite dalla rimozione del tipo di campione di surnatante e ulteriore elaborazione meccanica. Negli ultimi anni, c'è stata una crescente domanda di sistemi di automazione progettati per laboratori medi e grandi. È un'alternativa ai metodi manuali ad alta intensità di lavoro.
Qual è la differenza principale tra l'estrazione del DNA e l'estrazione dell'RNA nell'estrattore di DNA/RNA?
Quali sono i passaggi specifici per l'estrazione del DNA e l'estrazione dell'RNA?
Qual è l'estrattore DNA/RNA della funzione?
La differenza principale tra l'estrazione del DNA e dell'RNA è il livello di pH. È necessario un pH di 8 per l'estrazione del DNA ed è richiesto un pH di 4,7 per l'estrazione di RNA. Il DNA tende a denatura e ad entrare in una fase organica a pH acido. L'idrolisi alcalina dell'RNA in un ambiente alcalino si verifica a causa del 2 'OH nel ribosio. Inoltre, c'è un'altra differenza importante. Il processo di estrazione dell'RNA purifica l'RNA, mentre il processo di estrazione del DNA purifica il DNA. Il processo di estrazione del DNA procede attraverso questi stadi: catabolismo delle proteine e lipidi di membrana, lisi cellulare, aggregazione di cataboliti nella soluzione salina concentrata e precipitazione del DNA in presenza di etanolo. Questo processo in 3 fasi può includere due passaggi opzionali
Il processo di purificazione dell'RNA è costituito da 4 stadi distinti: lisi cellulare, denaturazione delle proteine, isolamento dell'RNA aggiungendo cloroformio e fenolo e lavando il pellet con etanolo. L'estrazione di RNA è la purificazione dell'RNA da campioni biologici. A causa della presenza di ribonucleasi nei tessuti e nelle cellule, il processo diventa complicato. L'uso della ribonucleasi può degradare rapidamente l'RNA. Il metodo comunemente usato nell'estrazione dell'RNA è l'estrazione di guanidina tiocianato-fenolo-cloroformio. Basato sul principio di centrifugazione e separazione di fase
L'estrazione del DNA che comporta la separazione e la purificazione del DNA è un processo chimico e fisico. I campioni di DNA possono essere ottenuti da blocchi di tessuto di paraffina, sangue, campioni di tessuto (congelati) e si verificano nelle seguenti fasi: lisi a cellule, isolamento del DNA e precipitazioni una volta lisciate, soluzioni sale concentrate promuovono l'aggregazione di molecole cataboliche. La soluzione viene quindi centrifugata per separare il DNA dai clump di detriti che il DNA differenziato è combinato con sali e reagenti utilizzati nel ciclo cellulare e la precipitazione dell'etanolo può essere utilizzata per un'ulteriore purificazione.
La funzione di a Estrattore DNA/RNA è isolare e purificare gli acidi nucleici DNA e RNA da un campione. Questo può essere fatto usando una varietà di metodi, ma il più comune è utilizzare gli enzimi per abbattere le proteine e altri componenti cellulari che possono essere presenti nel campione. Una volta isolati gli acidi nucleici, possono essere utilizzati per una varietà di scopi, come sequenziamento o PCR.
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